Jak tansy ovlivňuje játra?

Abstrakt vědeckého článku o základní medicíně, autor vědecké práce – Engalycheva E.E., Yakusheva E.N., Sychev I.A., Shchulkin A.V.

Polysacharidový komplex, který je glukuronoglykanovými látkami podobnými pektinu, byl izolován z květů tansy. Na modelu akutní toxické hepatitidy způsobené podáním 50% roztoku tetrachlormethanu byla hodnocena její hepatoprotektivní aktivita. Podle výsledků studie bylo zjištěno, že polysacharid snižuje aktivitu aspartátmintransferázy, snižuje hladinu malondialdehydu, zvyšuje počet volných sulfhydrylových skupin a aktivitu glutathion-S-transferázy v lyzátu erytrocytů, tzn. má výrazný hepatoprotektivní a antioxidační účinek.

Podobná témata vědecké práce na základní medicíně, autor vědecké práce – Engalycheva E.E., Yakusheva E.N., Sychev I.A., Shchulkin A.V.

Исследование цитопротекторной активности 8,8-диметил-5-n-толил-8,9-дигидро-2h-пиридо[4,3,2-de]циннолин-3(7h)-она

Stav glutathionového systému v tkáních potkanů ​​s traumatem muskuloskeletálního systému za podmínek methioninem indukované hyperhomocysteinémie

STUDIE HEPATOPROTEKTIVNÍ AKTIVITY KVĚTIN KOMPLEX POLYSACHARIDU TANSY

Polysacharidový komplex extrahovaný z květů tansy (Tanacetum vulgare L.) je glukuronolakton typu pektinů. Jeho hepatoprotektivní aktivita byla hodnocena na modelu akutní toxické hepatitidy způsobené zavedením 50% roztoku tetrachlormethanu. Bylo zjištěno, že polysacharid snižuje aktivitu asparteaminotransferázy, snižuje hladinu malondialdehydu, zvyšuje množství volných SH-skupin a aktivitu glutathiontransferázy v lyzátu erytrocytů, tj. polysacharidový komplex má výrazné hepatoprotektivní a antioxidační vlastnosti.

Text vědecké práce na téma “Studie hepatoprotektivní aktivity polysacharidového komplexu květů třísloviny”

© Kolektiv autorů, 2015 MDT 615.322:547.458].015.4:616.36

STUDIUM HEPATOPROTEKTIVNÍ AKTIVITY POLYSACHARIDOVÉHO KOMPLEXU KVĚTŮ NAPĚTÍ

JEJÍ. Engalycheva, E.N. Yakusheva, I.A. Sychev, A.V. Státní lékařská univerzita Shchulkin Ryazan pojmenovaná po. akad. I.P. Pavlova, Rjazaň

Polysacharidový komplex, který je glukuronoglykanovými látkami podobnými pektinu, byl izolován z květů tansy. Na modelu akutní toxické hepatitidy způsobené podáním 50% roztoku tetrachlormethanu byla hodnocena její hepatoprotektivní aktivita. Podle výsledků studie bylo zjištěno, že polysacharid snižuje aktivitu aspartátmintransferázy, snižuje hladinu malondialdehydu, zvyšuje počet volných sulfhydrylových skupin a aktivitu glutathion-8-transferázy v lyzátu erytrocytů, tzn. má výrazný hepatoprotektivní a antioxidační účinek.

Klíčová slova: polysacharidový komplex, tansy, hepatoprotektivní aktivita, antioxidační aktivita.

V současné době je mezi léčivými rostlinnými materiály věnována velká pozornost hledání a vývoji vysoce účinných hepatoprotektorů. S ohledem na prevalenci toxického poškození jater je v jejich léčbě považováno za vhodné a opodstatněné použití hepatoprotektivních léků, které by vykazovaly antioxidační účinek, zvyšovaly aktivitu endogenního antioxidačního systému a korigovaly metabolické procesy [2,9].

Velmi slibnou skupinou sloučenin jsou v tomto ohledu rostlinné polysacharidy.

Materiály a metody

Polysacharidový komplex květů tansy (PSP) byl izolován z květů tansy sušených na vzduchu (Tesveki tansy, Zdorovye LLC, Rusko) trojnásobnou extrakcí 1% roztokem šťavelanu amonného, ​​vysrážení a čištění bylo provedeno postupným přidáváním ethanolu aceton

a ether. V předběžných studiích bylo studováno složení, fyzikálně-chemické vlastnosti a navržena metoda standardizace PSP [5].

Ke studiu hepatoprotektivní aktivity byl použit 3% roztok PSP v dávce 0,3 g/kg tělesné hmotnosti [5]. Studie byla provedena na 28 outbredních krysách linie CD (Sprague Dawley), o hmotnosti 150200 708 g, získaných ze školky Stolbovaya, chovaných za standardních podmínek vivária. Studie na zvířatech byly provedeny v souladu s „Pravidly pro provádění práce na pokusných zvířatech“ (nařízení Ministerstva zdravotnictví Ruské federace 23.08.2010n ze dne 4. srpna 7). Zvířata byla rozdělena do 50 skupin po 0,1 jedincích. Akutní toxická hepatóza-hepatitida byla modelována intragastrickým podáváním 100% olejového roztoku tetrachlormethanu v dávce 8 ml na XNUMX g hmotnosti zvířete dvakrát obden (kontrola patologie) [XNUMX].

První skupina pokusných zvířat denně po dobu 7 dnů (zač

1 den po posledním podání CCl4) byl podán PSP. Účinnost léku byla hodnocena 24 hodin po konečném podání léku (8. den) podle následujících ukazatelů: aktivita AST a ALT, alkalická fosfatáza (ALP), glutathion-transferáza (GST), glutathionperoxidáza (GPx) a také hladina malondialdehydu (MDA) a volných sulfhydrylových skupin (GSH) v krevní plazmě a lyzátu erytrocytů, jako markerů stavu peroxidace lipidů (LPO). Studované parametry byly stanoveny následovně: koncentrace MDA (nmol/mg proteinu) reakcí s kyselinou thiobarbiturovou (podle metody Steel D.I., Gorishvili T.G., 1977), hladina GSH (μmol/mg proteinu) redukční reakcí disulfid-5,5 ,2-dithiobis-1972-nitrobenzoát (podle metody Habeeba, 150) na spektrofotometru Shimadzu UV-02-1967, aktivita GPx (nmol NADP/min*mg proteinu) podle reakce enzymatické redukce glutathionu s tert. -butylhydroperoxid (podle metody Paglia DE, Valentine WN, 1978 modifikovaný Lankinem V.Z.), aktivita GST (nmol CDBN/min*mg proteinu) podle metody JN Keena, WB Iakoby (2000) za použití biochemické látky Humalyzer XNUMX analyzátor.

Druhá skupina zvířat dostávala srovnávací lék – extrakt z plodů ostropestřce mariánského (Karsil, So-pharma, Bulharsko) – ekvivalent silymarinu – v dávce 100 mg/kg [3] v dávkovacím režimu.

hodnoty polysacharidů. Intaktní zvířata a krysy v kontrolní skupině dostávaly purifikovanou vodu ve stejném objemu.

Statistické zpracování získaných výsledků bylo provedeno pomocí aplikačních programů MSExel 2010 a Statsoft Statistica 8.0. Data jsou prezentována jako aritmetický průměr a standardní chyba průměrného výsledku (M±m) pro normální rozdělení dat a jako medián, horní a dolní kvartily pro nenormální rozdělení dat. Povaha distribuce dat byla hodnocena pomocí Shapiro-Wilkova testu. Přítomnost statisticky významných meziskupinových rozdílů byla stanovena pomocí jednocestné analýzy rozptylu (ANOVA), rozdíly mezi skupinami byly považovány za významné na hladině významnosti p

Výsledky a jejich diskuse

Izolovaný polysacharidový komplex květů tansy je amorfní hmota světle šedé barvy. Pomocí chromatografie na tenké vrstvě bylo stanoveno monosacharidové složení PSP: glukóza, galaktóza, xylóza a arabinóza. Vysoký obsah uronových kyselin (84,70 %) nám umožňuje zařadit izolovaný komplex do třídy glykuronoglykanů jako jsou pektinové látky [3].

Ukazatele funkčního stavu, LPO a antioxidační ochrany jater u intaktních zvířat jsou uvedeny v tabulkách 1 a 2.

Vliv PSP a silymarinu na aktivitu jaterních enzymů u experimentální hepatitidy

Skupinový indikátor Intaktní n=7 Kontrola hepatitidy n=7 Léčba hepatitidy pomocí PSP n=7 Léčba hepatitidy silymarinem n=7

AST 81,03±6,02 123,50±24,66* 93,95±10,29** 90,18±8,82**

ALT 23,00±2,00 57,21±5,00* 49,96±7,55 38,75 (34,90:43,00)**

ALP 306,33±14,74 836,82±286,47* 875,17±255,08 857,70 (528,50:897,00)

V tabulkách 1 a 2: * – srovnání s intaktními zvířaty (p<0,05), ** – srovnání s patologickou kontrolou (p<0,05)

Vliv PSP a silymarinu na stav peroxidace lipidů a antioxidační ochranu u experimentální hepatitidy

Skupinový indikátor Intaktní n=7 Kontrola hepatitidy n=7 Léčba hepatitidy pomocí PSP n=7 Léčba hepatitidy silymarinem n=7

MDA hemolyzát 6,90±0,55 13,89±5,50 9,01±1,06 7,48±1,94

plazma 29,12±1,97 45,41±8,57* 31,70 (28,27:39,83)** 33,84 (32,13:37,27)**

GSH hemolyzát 42,90 (42,74:43,06) 22,63±3,47* 45,18±8,25** 25,65±9,68

plazma 40,99±5,35 26,20±3,92* 29,41±4,40 34,31±4,27**

GST hemolyzát 12,85±4,53 5,36±0,74* 7,67±2,12** 5,11 (4,46:23,24)

plazma 257,85 (238,80:276,90) 210,95±41,30 176,83±31,10 219,63±67,43

ORx hemolyzát 1,22±0,41 0,50±0,17* 0,91±0,34 0,93±0,29

plazma 36,05 (31,50:40,60) 22,18±15,43 19,00±4,57 27,07±2,11

Podávání tetrachlormethanu způsobilo akutní toxické poškození jater u potkanů, doprovázené aktivací LPO. Aktivita jaterních enzymů významně vzrostla ve srovnání s údaji od intaktních zvířat: AST – 1,52krát, ALT – 2,48krát, ALP – 2,73krát. Hladina MDA v krevní plazmě vzrostla 1,56krát (p<0,05), hladina GSH v erytrocytárním lyzátu a v krevní plazmě klesla 1,90krát a 1,56krát (p<0,05), hladina GST resp. GPx v hemolyzátu se snížil 2,40krát a 2,44krát (p<0,05).

U zvířat s toxickou hepatitidou, která dostávala PSP po dobu 7 dnů, se hladina AST a ALT snížila ve srovnání s kontrolní patologií 1,31krát

Rýže. 1. Aktivita (jako procento normálu) jaterních enzymů v krevní plazmě 8. den u potkanů ​​s hepatitidou a při její léčbě PSP a silymarinem

Rýže. 2. Obsah (v procentech normy) MDA, thiolových skupin a antioxidačních enzymů v hemolyzátu erytrocytů 8. den u potkanů ​​s hepatitidou a při jeho léčbě PSP a silymarinem

U zvířat, která dostávala silymarin k léčbě toxické hepatitidy, došlo k významnému snížení aktivity AST a ALT (2,56krát a 1,48krát, v tomto pořadí) ve srovnání s patologickými kontrolními údaji. Hladina MDA v hemolyzátu erytrocytů této série krys

Rýže. 3. Obsah (v procentech normy) MDA, thiolových skupin a antioxidačních enzymů v krevní plazmě 8. den u potkanů ​​s hepatitidou a při její léčbě PSP a silymarinem

U potkanů ​​z kontrolní skupiny patologie vedla akutní toxická hepatitida ke zvýšení hladiny aminotransferáz a alkalické fosfatázy, aktivaci procesů peroxidace lipidů, což je v souladu s výsledky jiných autorů [1, 3, 4].

Snížení hladiny AST v krevním séru zvířat s toxickou hepatózou-hepatitidou během léčby PSP ukazuje na snížení cytolýzy a poškození buněčných membrán hepatocytů. Aktivita alkalické fosfatázy se však během léčby hepatitidy CC14 pomocí PSP a silymarinu nesnížila, což je typické pro přetrvávající cholestázu a/nebo ztukovatění jater. Polysacharidový komplex květů tansy, používaný k léčbě hepatitidy, má tedy membránově stabilizační, hepatoprotektivní a antioxidační účinek, což je potvrzeno poklesem hladiny MDA a zvýšením obsahu bezproteinových thiolových skupin. v hemolyzátu erytrocytů a krevní plazmy. Mechanismus antioxidačního účinku PSP může být způsoben jak schopností přímo interagovat s volnými radikály díky přítomnosti karboxylových a hydroxylových skupin ve struktuře molekuly polysacharidu, tak aktivací enzymů odpovědných za rozklad peroxidových sloučenin. [6], což potvrzují naše data. Kromě toho je polysacharidový komplex povrchově aktivní látkou a je schopen tvořit ochrannou vrstvu na povrchu molekul, interagovat s glykoproteiny a proteoglykany glykokalyxu [7], což zřejmě brání jejich oxidační modifikaci.

1. Hepatitida způsobená u potkanů ​​podáním tetrachlormethanu je doprovázena zvýšením procesů peroxidace lipidů, snížením obsahu bezproteinových thiolových skupin, aktivitou glutathion-transferázy a glutathionperoxidázy v hemolyzátu a krvi. plazma.

2. Polysacharidový komplex květů třísloviny má he-

patoprotektivní účinek snížením cytolýzy, snižuje aktivitu AST v krevní plazmě a také vykazuje výrazný antioxidační účinek, charakterizovaný snížením koncentrace MDA v krevní plazmě, zvýšením obsahu bezproteinových thiolových skupin a glutathion-transferázová aktivita v hemolyzátu.

3. Polysacharid z květů tansy je horší než silymarin v hepatoprotektivní aktivitě, ale lepší než v antioxidačním působení.

1. Antioxidační účinky thiofanu při experimentálním poškození jater tetrachlormethanem / V.I. Smolyakova [a další] // Bulletin sibiřské medicíny. – 2010. – č. 5. -S. 98-101.

2. Hepatoprotektivní aktivita 2-des-methoxykarbonyl-2-ethoxykarbonyl-11-deoxymisoprostolu / T.A. Sapozhnikova [a další] // Experimentální a klinická farmakologie. -2007. – T. 70, č. 4. – S. 30-31.

3. Ivanova V.V. Studium hepatoprotektivního účinku rostlinného extraktu z březové kůry u experimentální hepatitidy způsobené tetrachlormethanem // Fundamental Research. – 2013. -№3. – s. 277-279.

4. Studium hepatoprotektivních vlastností suchého extraktu z listů meruněk na modelu poškození jater tetrachlormethanem / A.L. Strobl [a další] // Bulletin Ruské akademie lékařských věd. -2013. – Ne. 3. – s. 68-72.

5. Kirichenko E.E., Sychev I.A., Chekulaeva G.Yu. Izolace, fyzikálně-chemické studium a stanovení solubilizační aktivity polysacharidů z květů tansy // Ros. medico-biol. Vestn. jim. akad. I.P. Pavlova. – 2012. – č. 4. – s. 146-150.

6. Kolenčenko E.A. Srovnávací hodnocení antioxidační aktivity neškrobových polysacharidů: abstrakt.

dis. . Ph.D. biol. Vědy / E.A. Kolen-čenko. – Vlad, 2004. – 28 s.

7. Laksaeva E.A., Sychev I.A. Vliv polysacharidu oskeruše na odolnost membrán erytrocytů // Ros. medico-biol. Vestn. jim. akad. I.P. Pavlova. – 2013. – č. 1. – s. 65-68.

8. Pokyny pro provádění preklinických studií léčivých přípravků

fondy / pod obec vyd. DOPOLEDNE. Mironov. – M.: Grif i K, 2012. – 1. díl. – 944 s.

9. Srovnávací hodnocení hepatoprotektivní aktivity suchého kukuřičného extraktu s blizny a jeho směsí s enterosorbenty / L.G. Dvorníková [a další] // Základní výzkum. – 2012. – č. 10-12. – s. 393-396.

STUDIE HEPATOPROTEKTIVNÍ AKTIVITY KVĚTIN KOMPLEX POLYSACHARIDU TANSY

EE Engalycheva, EN Yakusheva, IA Sychov, AV Shchulkin

Polysacharidový komplex extrahovaný z květů tansy (Tanacetum vulgare L.) je glukuronolakton typu pektinů. Jeho hepatoprotektivní aktivita byla hodnocena na modelu akutní toxické hepatitidy způsobené zavedením 50% roztoku tetrachlormethanu. Bylo zjištěno, že polysacharid snižuje aktivitu asparteaminotransferázy, snižuje hladinu malondialdehydu, zvyšuje množství volných SH-skupin a aktivitu glutathiontransferázy v lyzátu erytrocytů, tj. komplex polysacharidů má výrazné hepatoprotektivní a antioxidační vlastnosti.

Klíčová slova: polysacharidový komplex, tansy (Tanacetum vulgare L.), hepatoprotektivní aktivita, antioxidační aktivita.

Engalycheva E.E. – asistent Katedra obecné chemie s kurzem bioorganické a organické chemie Státní lékařské univerzity Rjazaň Ministerstva zdravotnictví Ruska.

Yakusheva E.N. – doktor lékařských věd, prof., přednosta. Katedra farmakologie s kurzem farmacie FDPO GBOU HPE Ryaz Státní lékařská univerzita Ministerstva zdravotnictví Ruska.

Sychev I.A. – doktor biologických věd, přednosta. Katedra obecné chemie s kurzem bioorganické a organické chemie Státní lékařské univerzity Rjazaň Ministerstva zdravotnictví Ruska.

Shchulkin A.V. – Ph.D., asistent. Katedra farmakologie s kurzem farmacie FDPO GBOU HPE Ryaz Státní lékařská univerzita Ministerstva zdravotnictví Ruska.