Imunita drůbeže vůči infekčním chorobám je rozhodující měrou závislá na funkčním stavu imunitního systému organismu, který je ovlivněn různými imunosupresivními faktory: porušením krmení a dodržování norem pro drůbež, nízkou kvalitou krmiva, jeho kontaminací oportunní mikroflórou, vakcinačním programem atd. (Yu. V Konopatov, E. E. Makeeva, 2000). Kromě toho mohou mít na imunitní systém významný dopad také viry, bakterie, mykoplazmata a další infekční agens. Mezi patogeny potlačujícími fungování imunitního systému vynikají viry kuřecí infekční bronchitidy (IB), Newcastleské choroby (ND), infekční burzovní choroby (IBD) aj. Vykazují především tropismus pro lymfoidní buňky, způsobují jejich ničení a blokování imunitní odpovědi ptáka (E. Montiel, 1998). Poškození imunitního systému viry vede k imunodeficienci, čímž se snižuje schopnost ptáka odolávat dalším patogenům infekčních chorob. Charakter a rozsah poškození imunitního systému závisí na věku, ve kterém k infekci došlo, přítomnosti pasivní imunity a možných komplikacích onemocnění s jinými virovými onemocněními. Virová onemocnění způsobující imunosupresi významně ovlivňují ekonomickou výkonnost drůbežích farem. Přímé poškození je spojeno se smrtí infikovaného ptáka a přítomností pasivní imunity. Nepřímé ekonomické ztráty jsou způsobeny poklesem růstu a produktivity vajec, poklesem imunologické odpovědi na očkování, projevem sekundárních infekcí (kolibacilóza), komplikovanými průběhem dalších onemocnění (infekční bronchitida, mykoplazmóza, kokcidióza atd.) .
Pro zvýšení imunitní odpovědi drůbeže na specifické činnosti prováděné v intenzivním průmyslu se stále častěji používají léky, které stimulují přirozenou odolnost a imunitní odpověď organismu drůbeže. Jedním z těchto léků je fosprenil, derivát polyprenolů získávaných z jehličí borovice.
Polyprenoly jsou nedílnou součástí biologických membrán buněk všech živých organismů. Ovlivňují mnoho fyzikálně-chemických a strukturně-funkčních vlastností membrán (tekutost, permeabilita, teplota fázového přechodu, tvorba nedvojvrstvých struktur). Fosforované. Ve své formě tyto sloučeniny působí jako intermediární akceptory sacharidových zbytků v procesu biosyntézy glykoproteinů (L. L Danilov et al., 1996). Fosforylované polyprenoly se vyznačují následujícími vlastnostmi: mají antivirovou aktivitu proti lidským a zvířecím virům, které mají superkapsidový obal (A. V. Pronin a kol., 1996, 1998; S. V. Ozherelkov a kol., 2000); stimulovat přirozenou rezistenci a produkci cytokinů za podmínek experimentálního modelování (A. V. Sanin et al., 1998; A. V. Pronin et al., 2000); u zdravého mladého skotu aktivují metabolické procesy, růst a vývoj, stimulují nespecifické obranné mechanismy, zvyšují intenzitu imunitního systému při očkování proti bakteriálním infekcím (T. N. Raková, A. V. Deeva, 1999); u zdravých psů stimulují imunitu při očkování proti virovým infekcím (A. M. Arzhaev et al., 1999). Ve veterinární praxi se fosforylované polyprenoly používají pod obchodním názvem „fosprenil“ od roku 1996 k léčbě a nespecifické prevenci virových onemocnění psů. Výsledky klinických studií na psech se spontánně infekčními virovými onemocněními potvrdily, že fosprenil má antivirovou aktivitu a stimuluje přirozenou rezistenci. Droga je neškodná.
V tomto ohledu bylo objasnění efektu a proveditelnosti použití fosprenilu v průmyslovém chovu drůbeže velmi zajímavé a bylo cílem naší studie.
První experiment ke studiu účinku fosprenilu na imunitní odpověď drůbeže na pozadí její vakcinace antivirovými vakcínami byl proveden v roce 2002 v CJSC AIC Veliky Novgorod, specializující se na výkrm brojlerů. Brojlerová kuřata křížence Ross-308 byla přijata na výkrm. Byly vytvořeny dvě skupiny: experimentální skupina (19 700 zvířat) a kontrolní skupina (19 500 zvířat). Kuřata byla získána z rodičovského hejna ve věku 325 dní. Životní podmínky pro všechna kuřata byly stejné. Při umístění na výkrm v jednom dni věku byla průměrná hmotnost jednoho kuřete 40±2 g. Brojleři byli chováni na podlaze při hustotě osazení 19 ptáků. za 1 m2. Pití bradavek rychlostí 18 gólů. na 1 bradavku. Krmení předních 65 gólů. pro 1 podavač. Při výkrmu brojlerů bylo použito granulované krmivo. Všichni ptáci byli imunizováni živými antivirovými vakcínami podle následujícího schématu: 1. den (po vylíhnutí) – proti kuřecí infekční bronchitidě (IB) vakcínou z kmene H-120 metodou spreje; 10. den – proti IB kuřatům zálivkou; 14. den – proti infekční bursální nemoci (IBD) vakcínou z kmene Winterfield pitnou metodou; 19. den – proti newcastleské chorobě (ND) virovou vakcínou z kmene “La Sota” pitnou metodou.
V experimentální skupině byl před každou vakcinací (méně než 6 hodin) použit fosprenil (0,4% roztok fosforylovaných polyprenolů) v dávce 0,05 ml/kg živé hmotnosti. Potřebný objem léčiva (ml) byl vypočten na základě počtu a hmotnosti ošetřovaných kuřat a medikátor byl nalit do nádobky (na podávané látky). V posledně jmenovaném případě byl fosprenil dávkován zředěný dalších 100krát v destilované vodě, poté byl roztok dodáván do napáječek z bradavek. Kuřata (v poměru 18 kuřat na bradavku) pila roztok 1 h. V kontrolní skupině nebylo léčivo použito.
Během experimentu byly vzaty v úvahu klinický stav ptáka, bezpečnost, průměrné denní přírůstky, náklady na krmivo na 1 cent přírůstku a výtěžnost produktu. Výsledky byly vzaty v úvahu 1., 7., 14., 21., 28., 35. a 40. den. Pro účely sérologického testování na přítomnost získané imunity proti ND, IB a IBD byly bezprostředně před porážkou drůbeže odebrány vzorky krevního séra. Laboratorní studie ke stanovení síly imunity (na základě stanovení titrů antivirových protilátek) proti NB byly provedeny v novgorodské regionální veterinární laboratoři metodou TGA, proti infekční bronchitidě kuřat a infekční burzální chorobě a laboratoří Biochek pomocí metodou ELISA.
Při použití fosprenilu spolu se specifickými preventivními opatřeními byly získány pozitivní výsledky u brojlerových kuřat. V kontrolní skupině bylo 1. den experimentu 19 500 zvířat. (bezpečnost 100 %), 7. – 19 090±95 (97,89 %), 14. – 18 900 ± 95 (96,92 %), 21. – 18 837 ± 94 (96,6, 28 %), 18. den – 661 ±93 (95,7 %), 35. – 18 110 ± 90 (92,87 %), 40. den – 17 686 ± 88 gólů. (90,7 %). V experimentální skupině bylo 1. den 19 700 zvířat. (100 %), 7. – 19 414±97 (98,55 %), 14. – 19 314 ± 96 (98,04 %), 21. den – 19 160 ± 96 (97,26, 28 %), 18. – 964 95 ± 96,26 (35 %), 18. – 378 92±93,29 (40 %), 18. den – 158 91 ± 92,17 gólů. (288 %) se podařilo zachránit dalších 100 branek. ptactvo. V experimentální skupině ptáci nabírali tělesnou hmotnost rychleji. Průměrná živá hmotnost byla vypočtena na základě vzorku 1 zvířat. V kontrolní skupině byla 40. den pokusu průměrná živá hmotnost jednoho kuřete 02±7 g, 154. den 0,77±14, 353. den – 1,77±21, 745. den – 3,73±. 28, 1110, 5,55. – 35±1500, 7,5. – 40±1800 a 9. den – 40±0,2 g, v experimentální skupině – respektive 158±0,77, 390±1,95, 790±3,95, 1160± 5,8±1600, 8±1934, 9,67±134 g. Zjištěný rozdíl byl 3 g. To je více než 40krát odlišné od průměrného rozptylu v živé hmotnosti, rovnající se takovému vzorku 19 g. Navíc rozdíl mezi celková živá hmotnost kuřat v pokusné a kontrolní skupině (za předpokladu, že počáteční počet kuřat v pokusné a kontrolní skupině byl vyrovnán na 500 40) dosáhla do 2680. dne XNUMX kg.
Spotřeba krmiva na 1 c růstu v experimentální skupině byla 1,9 cv kontrolní skupině – 1,98 c. Při porážce brojlerů v pokusné skupině byla výtěžnost masa 70 % (66 % u kontroly). Nárůst byl zaznamenán v kategorii masa. Do první kategorie bylo zařazeno 75 % jatečně upravených těl v experimentální skupině, 70 % v kontrolní skupině a počet nestandardních těl byl 4,8 a 7,5 %. Za účelem provedení sérologických studií na přítomnost protilátek proti newcastleské chorobě (původcem je paramyxovirus) byly odebrány vzorky krevního séra 20. den po vakcinaci 36 kuřatům ve věku 38 dnů (20 z experimentální skupiny, 16 z kontrolní skupiny). skupina). U všech studovaných ptáků experimentální skupiny byly zjištěny titry ochranných protilátek od 1:8 do 1:512. V kontrolní skupině mělo k uvedenému datu 18 % ptáků titr protilátek 1:4. Tito ptáci nejsou imunologicky chráněni a jsou potenciálně nebezpeční – jako možný zdroj onemocnění. V kontrolní skupině bylo 82 % imunologicky chráněných ptáků.
Při analýze titrů protilátek proti viru onemocnění Gumboro (způsobeného reovirem) v experimentální skupině (16 ptáků) byly titry ochranných protilátek nalezeny u všech ptáků, tj. 24. den po vakcinaci bylo imunologicky všech 100 % ptáků. chráněný. Průměrný titr je 1:8489 (norma 1:2500 – 1:10 000), variační koeficient je 43 (norma 20-45) Průměrný titr a variační koeficient odpovídá normě akceptované v laboratoři. V kontrolní skupině (10 ptáků) dostaly 3 ptáci nízké titry protilátek (1:63). Počet imunologicky chráněných ptáků v kontrole tak činil 70 %. Průměrná hodnota titru v kontrole je pod normou: 1:809 (s normou 1:2500-1:10 000), variační koeficient je vysoký – 81 (norma je 20-45).
Při analýze titrů protilátek proti viru infekční bronchitidy kuřete (původcem je koronavirus) se ukázalo, že v experimentální skupině (16 ptáků) měl 28. den po vakcinaci pouze jeden pták nízké titry protilátek (1:221). Počet imunologicky chráněných ptáků v pokusné skupině je tedy 94 %. Průměrný titr je 1:1094 (norma je 600-3000), variační koeficient je 41 (norma je 20-60), což odpovídá normě akceptované v laboratoři. V kontrolní skupině (10 ptáků) měl ochranný titr pouze jeden pták (1:821), počet imunologicky chráněných ptáků byl 10 %, průměrný titr protilátek byl nízký (1:208) a variační koeficient byl vysoká (108). Tato studie získala přesvědčivá data ukazující, že fosprenil má pozitivní vliv na úroveň a trvání ochranné humorální imunity u kuřat v reakci na živé vakcíny proti ND, IBD a IB. Věk ptáka je jedním z faktorů určujících aktivitu lymfoidní tkáně, u mláďat je aktivnější. Podání fosprenilu v první den života proto podle našeho názoru přispívá k nejoptimálnějšímu projevu jeho stimulačního účinku.
V době porážky v experimentální skupině převažovali ptáci s vysokými titry protilátek. To svědčí o tom, že fosprenil nejenže nezasahuje do vývoje vakcinačního procesu, ale naopak stimuluje imunitní odpověď. V kontrolní skupině byli současně identifikováni ptáci s nízkými titry protilátek. Představují potenciální zdroj reprodukce viru a šíření virové infekce. Všechny použité očkovací přípravky patřily do kategorie živých vakcín, avšak při použití fosprenilu byla lepší nejen úroveň imunitní odpovědi na ně, ale i jejich tolerance kuřecím tělem. Svědčí o tom ukazatele bezpečnosti a růstu.
Vývojáři léku spojují vyšší hladinu specifických protilátek proti vakcínám se stimulačním účinkem fosforylovaných polyprenolů na makrofágové buňky u zvířat a ptáků. Makrofágy jsou široce zastoupeny v těle ptáků. Při stimulaci se zvyšuje migrační, fagocytární a lysozomální aktivita, což koreluje s přirozenou odolností ptáka. Aktivované makrofágy také zvyšují svou schopnost prezentovat antigen, který se dostal do těla (spolu s molekulami hlavního histokompatibilního komplexu) pomocným T-lymfocytům, které na jedné straně stimulují B-buňky k transformaci na plazmatické buňky produkující protilátky. a na druhé straně poskytují potřebnou úroveň a trvání imunologické paměti. Již dříve bylo prokázáno, že makrofágy aktivované fosprenylem produkují vyšší hladiny interleukinu 1, který reguluje rozvoj zánětlivé reakce a zároveň je mediátorem, který spouští proliferaci pomocných T-lymfocytů, jejichž aktivita určuje hladinu imunitní odpověď.
Byly tedy získány důkazy o pozitivním účinku fosprenilu na úroveň a trvání ochranné humorální imunity u brojlerových kuřat. Současně se zvýšila bezpečnost a růst ptáků, zlepšila se kvalita masa a snížily náklady na krmivo na jednotku produkce. Do 38. dne života byla zaznamenána 100% imunita vůči Newcastleské chorobě a Gumborově chorobě. Všichni ptáci měli ochranné titry protilátek. Intenzita imunity vůči infekční bronchitidě kuřat v experimentální skupině byla 94% a v kontrolní skupině – 10%.
Při použití fosprenilu v období odchovu brojlerů nebyly zjištěny žádné toxické vedlejší účinky: kuřata se vyznačovala klidným chováním, byla rovnoměrně rozmístěna po místnosti a po celou dobu výkrmu aktivně konzumovala krmivo a vodu. Prevence pouze přímých ekonomických ztrát (zvýšením bezpečnosti) určuje ekonomickou efektivitu užívání léku. Současně za 1 rub. výdaje obdržely 16 rublů. dorazil. Při hodnocení prevence nepřímých ekonomických ztrát (v důsledku snížení produktivity) bylo zjištěno, že po použití fosprenilu bylo získáno dalších 2680 kg hrubého výnosu živé hmotnosti.
Závěr. Získané výsledky pozitivního vlivu na úroveň a trvání humorální imunity, zvýšení bezpečnosti a růstu, zlepšení kvality masa a snížení nákladů na krmivo nám umožňují dospět k závěru, že při výkrmu brojlerových kuřat je vhodné používat fosprenil.
