Růst onkologických a infekčních onemocnění předurčuje potřebu vyvinout metody pro získávání nových léků s antivirovými, antibakteriálními, protirakovinnými a imunomodulačními vlastnostmi. Takové léky jsou komplexně studovány pomocí různých vědeckých metod.
Práce je věnována spektrálním studiím léku Izatizon a vytvořeného komplexu Izatizone + Stříbro. Jsou také uvedeny některé údaje o biologické aktivitě léčiv.
Klíčová slova: Izatizon, komplex Izatizon+stříbro, spektrální analýza, cytotoxicita léčiv
Růst rakoviny a infekčních onemocnění způsobuje vývoj metod výroby nových léků s antivirovými, antibakteriálními, protirakovinnými a imunomodulačními vlastnostmi. Takové léky jsou plně studovány různými vědeckými metodami.
Práce je věnována spektrálnímu zkoumání přípravy isatizonu a vytvoření komplexu Isatizone + stříbro. Jsou také uvedeny některé údaje o biologické aktivitě léčiv.
Klíčová slova: Isatizon, Isatizon + komplex stříbra, spektrální analýza, cytotoxicita léčiv.
Úvod:
Prudký nárůst počtu infekčních a onkologických onemocnění je spojen se zhoršováním životního prostředí, které způsobuje značné zatížení přírodních zdrojů i lidí a je příčinou i důsledkem změny klimatu. To v konečném důsledku vede k degradaci životního prostředí a krizi udržitelnosti živých organismů. Proto je velmi důležité vytvořit| a studovat| léky, které přímo ovlivňují jak původce onemocnění, tak imunitní systém, normalizují jeho působení. Jedním z těchto léků je Izatizone, vytvořený A.I. Potopalsky a spoluautoři, kteří navrhli rozpustnou formu methizonu, čímž rozšířili spektrum jeho účinku [1]. Marboran neboli methizon byl navržen pro léčbu virových onemocnění. Aktivita metisazonu byla testována v ohniscích neštovic (Indie) a byl prokázán jeho významný preventivní účinek. Výskyt osob, které se dostaly do kontaktu s neštovicemi, dosáhl 6,9 % (1126 osob, 78 onemocnělo, z toho 12 zemřelo), zatímco pouze 0,3 % osob, které dostaly lék profylakticky, onemocnělo mírným průběhem onemocnění (1101 lidí, 3 onemocněli). Předpokládá se, že mechanismem účinku metisazonu je jeho zahrnutí do šroubovice deoxyribonukleové kyseliny nebo tvorba chelátových sloučenin s ionty mědi [2]
Je známo, že mnoho volných kovových iontů hraje důležitou funkční roli inhibicí virově specifických enzymů. To samozřejmě může vysvětlit inhibiční účinek zinku (Zn) na replikaci viru herpes simplex [3]. Proto byly kovy použity k získání nových thiosemikarbazonů, izatin-thiosemikarbazonů. Byli jsme první, kdo studoval strukturní rysy molekuly metisazonu a zaznamenali jsme její schopnost měnit se. Všimněme si strukturního a dynamického znaku molekuly methizonu – její strukturální „lability“: o čemž svědčí přítomnost čtyř nízkých frekvencí základních vibrací – 39, 46, 69 a 81 cm-1 v jejím vibračním spektru [4].
Dlouholetá práce na léku a jeho efektivním využití ve veterinární medicíně a na dobrovolnících na klinice naznačuje potřebu jeho dalšího výzkumu a vytvoření nových analogů Izatizone. Ionty stříbra se účastní metabolických procesů v těle. V závislosti na koncentraci mohou jeho kationty buď stimulovat nebo inhibovat aktivitu řady enzymů. V tomto ohledu byl na základě Izatizon vytvořen komplex Izatizon + Silver.
Materiály a metody:
Izatizon byl přijat na Institutu zdraví a obrody národů Ukrajiny.
Komplex Izatizon-Silver byl získán v Ústavu molekulární biologie a genetiky Národní akademie věd Ukrajiny.
Kvantitativní analýza složení léčiva byla stanovena pomocí záznamového spektrofotometru UA-VIS (Německo).
IR spektroskopie byla provedena na Varian 3100 FT_IR IR spektrometru Eskalibur (USA).
Měření velikosti částic a ð-potenciálu léčiv bylo provedeno pomocí dynamického rozptylu světla na zařízení 90 Plus S/N, Brookhaven Instruments Corporation (USA).
Studium průniku částic preparátu Izatizon a jeho komplexu do buňky bylo provedeno na buněčné kultuře MDCK pomocí konfokální mikroskopie Nikon Eclipse TE2000 a programu EZ-C1.
Cytotoxický účinek léčiv byl studován na buněčné kultuře K-562 lidské myeloidní leukémie.
Buněčné kultury MDCK a K-562 byly kultivovány v atmosféře 5% CO2 při 37 °C v kompletním živném médiu RPMI-1640 (Sigma, USA) s 10% inaktivovaným fetálním telecím sérem (FBS) (Sigma, USA), 2 mM L -glutamin (IBP “Bio-Test-Laboratory”, Ukrajina), 50 μM 2-merkaptoethanol (Berlín, Německo) a 50 μg/ml gentamicinu (“Zdorovye”, Ukrajina).
Cytotoxicita byla stanovena pomocí kolorimetrické metody pomocí MTT (Sigma, USA) [5]. Optická hustota vzorků byla měřena pomocí mikrospektrofotometru Multiscan Titertek MMC 340 (USA) při vlnové délce 540 nm.
Výsledky a jejich diskuse
Po získání komplexu Izatizon-Silver byly studovány fyzikálně-chemické parametry a cytotoxicita (in vitro). účinek léků
Obrázek 1 ukazuje spektra v ultrafialové a viditelné oblasti. Lze poznamenat, že jsou pozorovány malé změny v oblasti UV: redistribuce mezi viditelnou oblastí blízkého a středního UV záření a absorpce ve viditelné oblasti se snížily vlivem komplexu Izathizon+Silver ve srovnání s Izathizonem (asi 265 nm a 290 nm). -300 nm). V oblasti 355 nm komplex Izatizon + Stříbro absorbuje energii aktivněji než Izatizon a při 460 nm absorpce mizí. Tyto údaje naznačují schopnost isatizonu interagovat se stříbrem.
Obr. 1 Spektra léčiv ve viditelné a UV oblasti.
Infračervená spektroskopie (IR) byla použita k hlubšímu pochopení interakce Izatizonu s ionty stříbra. IR spektra uvedená na obr. 2 ukazují, že v komplexu Isatizon+Silver došlo ve srovnání s Izathizonem ke změně intenzity absorpce: změnila se síla pásu ve viditelné oblasti spektra (700 nm). Stříbro ovlivnilo vibrační spektra v oblastech 950–1200 nm a 1600–1700 nm. Dá se předpokládat, že v tomto případě se Stříbro váže se sírou nebo dusíkem v cyklické sloučenině β-isatin thiosemikarbazon [6] a to se projevuje na těchto vibracích.
Obr. 2 IR spektra studovaných léčiv.
Je známo, že všechny látky, jejichž atomy jsou v excitovaném stavu, vyzařují světelné vlny, jejichž energie je určitým způsobem distribuována po vlnové délce [3] a tyto přípravky obsahují ty elektronické systémy, které jsou zodpovědné za absorpci a záření v optický rozsah. Studium fyzikálně-chemických parametrů léčiva Izatizon a jeho komplexu Izatizon + stříbro (velikost částic, zeta potenciál) bylo provedeno na zařízení 90plus Brookhaven Instruments Corporation metodou dynamického rozptylu světla, určující velikost a tvar částic léčiva [ 6, 7|. Preparáty byly analyzovány ve vodném prostředí a v DMSO, což umožnilo stanovit velikosti částic na výšku a šířku. Stabilita léčiv je důležitým ukazatelem pro klinické použití. Přítomnost velkých agregátů v přípravcích brání jejich použití na klinice (in vivo).
Jak je vidět z tabulky. 1 ve vodě byla velikost částic Izatizonu 775 nm a v DMSO – 148,0 nm. V jeho komplexu se týden po přípravě výrazně zmenšila velikost částic (ve vodě -122 nm a v DMSO -142,4 nm), což ukazuje na možnost použití léků.
Zeta potenciál léčiv byl stanoven pomocí elektrokinetického analyzátoru na rozhraní pevná látka-kapalina. Jejich náboje se (po týdnu) stabilizovaly: u Izatizonu klesla z -20,9 mV na -4,1 mV a u jeho komplexu z -20,9 mV na -11,0 mV.
Pro vizualizaci intracelulárního průniku léčiva Izatizon a jeho komplexu do buněk byl použit laserový konfokální mikroskop a fotoaktivátor FFK-813 [8, 9].
Obrázky 3 a 4 ukazují výsledky 3hodinové inkubace léčiva Izatizon a Izatizon + stříbro s FFK 883 v buněčné kultuře MDCK. Během této doby léky pronikly membránou a cytoplazmou, jak naznačovala přítomnost červených granulí v Izatizone (obr. 3) a přítomnost nazelenalých granulí komplexu v buňkách MDCK (obr. 4).
Isatison ředění 300 30′ 250x 27.bmp
Rýže, 3. Průnik Izatizonu do buňky s fotoaktivátor FFK-813.
Isatison + Arg AI ředění 75 30′ 200x 9.bmp
Rýže. 4. Průnik komplexu Izatizon+Silver do buňky fotoaktivátorem FFK-813.
Biologická aktivita léčiv byla studována pomocí metody cytotoxicity na buněčné kultuře lidské myeloidní leukémie K-562.
Údaje uvedené v tabulce 2 ukazují, že Izatizon, když byl inkubován s buňkami K-562 (24 hodin), vykazoval cytotoxický účinek v dávkách 100,0 μg/ml (spolehlivý) a 10,0 μg/ml. Izatizone+Silver významně inhiboval vývoj maligních buněk v dávkách 100,0; 10,0 a 1,0 ug/ml. Stříbro spolehlivě vykazovalo cytotoxický účinek v dávkách 100,0; 10,0 a 0,1 μg/ml.
Tabulka 2.
Cytotoxicita léků (po vyhynutí) na buněčné kultuře lidské myeloidní leukémie K-562 (24 hodin inkubace)
Získaná data naznačují potřebu rozšířit studii areálu
Izatizone+Silver pomocí fyzikálně-chemických studií a biologických modelů in vitro a in vivo.
Závěry:
Provedené studie dávají důvod se domnívat, že výsledný komplex Izatizon+Silver je stabilní, biologicky aktivní sloučenina, která vyžaduje další studie in vitro a in vivo pro široké použití ve zdravotnictví a veterinární praxi.
Literatura:
- 1. Potopalsky A.I., Lozyuk L.V., Mirolyubova A.N., Besarabov B.F. Antivirový, protinádorový a antileukemický lék Izatizon. – K.: Věda. myslel. – 1991. – 192 s.
- 2. Bauer DJKlinické zkušenosti s antivirotikem marboran (N-methiylisatin-3-thiosemikarbason) // Ann. N.-.Y. Akad. Sci. – 1965. – N.130. – S. 110-117.
- 3. Čižov N.P. Antivirová aktivita kovových iontů a kovových chelátových sloučenin. // Nové přístupy k chemoterapii virových infekcí. Riga: Zinatne, -1991.- s. 28-36.
- 4. Zaika L.A., Bolsunova O.I., Potopalsky A.I. Antivirové, protinádorové a imunomodelující vlastnosti léku Izatizone: Monografie. – K.: Koloobig. – 2010. – 212 s.
- 5. Shpakova O.P., Pavlova K.S., Bulicheva T.I. MTT-kolorimetrická metoda pro měření cytotoxické aktivity přirozené celulitidy. // Klín. laboratoř. diag. – 2000. – č. 2. – S. 20–23.
- 6. Požarskij A.F. Sorosův vzdělávací časopis, Rok: 1996, Číslo: 6.S. 26-31. Článek „Heterocyklické sloučeniny v biologii a medicíně“.
- 7. Šmatov, G.P., Kargapolov A.V., Bryantseva V.M. Základní principy IR spektroskopie: Využití IR spektroskopie v medicíně, ekologii a farmacii. -Tver: 000 “Nakladatelství Triada”, 2003. – S. 20-49.
- 8. Hassan PA Analýza velikosti částic koloidních systémů dodávání léků dynamickým rozptylem světla//CRSNewsLetter. – 2O03. – sv. 1. – S. 13-17.
- 9. Boyarskiy VP Fotostabilní, amino reaktivní a ve vodě rozpustné fluorescenční značky na bázi sulfonovaného rhodaminu se zpevněným xantenovým fragmentem at al / Boyarskiy VP, Belov VN, Medda R.
Radukhivskaja Ludmila Lyubomirovna
IZATIZONE má široký rozsah antivirové aktivity, včetně virů přenášených DNA a RNA a virově-mikrobiálních asociací. Od chřipky po SNID – to je spektrum mého života. Jedná se o univerzální léčbu, která léčí akutní onemocnění dýchacích cest (bronchitida, bronchopneumonie), onemocnění dutiny ústní (od stomatitidy a parodontu včetně), onemocnění kůže a sliznic (herpes, lišejníky, erysipel, plísňové infekce) a lupénka, zánět pobřišnice, meningitida, encefalitida, dětské mozkové paraléry, růžová skleróza, hepatitida vigeria, melanoblastom, Nastyd, ne chřipka. s takovými boláky je to nervově vystavení lékařským metodám likivanni liki liki. A jak můžeme ušetřit peníze tím, že dáme těmto dvěma zemím pouze jeden lék – ISATIZONE, když chřipkou onemocní obrovské množství lidí! Je napřed a efektivně to oslavuje. A hlavně – všechny potřebné vedlejší činnosti. Lékaři, kteří utrácejí obrovské množství peněz za dodávky dovážených vakcín a vakcín, by mohli být ušetřeni na obličeji, listech smůly a „švédských“ sloganech atd. Je zřejmé, že pouze jeden lék může ušetřit velké množství státního rozpočtu.
Izatizon pomáhá bojovat s nemocemi včel. Včely poskytují lidem nejcennější složky pro zdraví a výživu – med, propolis, mateří kašičku. Sami okřídlení dělníci ale někdy potřebují lékařskou pomoc nebo prevenci. Isatizon je jedním z těch léků, které včelaři kupují, aby zlepšili zdraví svých mazlíčků.
Aplikace ve včelařství
Izatizon má antivirový, imunomodulační a antibakteriální účinek. Tento lék lze nazvat univerzální. Chrání hmyz před viry, plísněmi a bakteriemi. Nemá žádné nežádoucí vedlejší účinky. Lék je účinný při klíšťové varroatóze, virové paralýze, askoferóze a dalších houbových onemocněních.
Tyto pozitivní vlastnosti (poměr cena/výkon, kvalita a všestrannost použití) činí Izatizon jedním z nejpreferovanějších přípravků pro praktické včelaře.
Složení, formulář pro uvolnění
Žlutá kapalina s hořkou pachutí, vzhledem připomínající slunečnicový olej. Kompozice obsahuje N-methyl, dimethylsulfoxid, polyethylenglykol-400, isatin-beta-thiosemikarbazon.
Isatizon lze také použít k léčbě lidí. Za tímto účelem farmaceutické společnosti vyrábějí léky v aerosolových nádobách pro místní inhalaci. V některých případech lékárníci vyrábějí svíčky s isatizonem na objednávku.
Farmakologické vlastnosti
Lék se používá v následujících případech:
- k odstranění zánětlivých procesů;
- jako stimulant imunitního systému;
- zničit viry;
- pro preventivní účely k prevenci výskytu nádorových onemocnění;
- k boji proti patogenům askosferózy, klíšťatům.
Lék blokuje reprodukci patogenních mikrobů a virů a proniká přes přirozené biologické bariéry těla. Cestou má antihistaminový účinek.
Návod k použití
Isatison se snadno používá – stačí přidat tento lék do krmiva nebo s ním ošetřit plásty v úlu. Jak lék používat: rozpusťte jej v teplé vodě v poměru 1:50, nalijte výsledný roztok do rozprašovače a postříkejte rámky, jeden po druhém je vyjměte z úlu. To je nezbytné pro maximální zavlažovací plochu. Pokud používáte Izatizon jako profylaktiku, musíte ředit v poměru 1:100.
Droga je vhodná nejen k léčbě včel, ale i jiných hospodářských zvířat a ptactva. Moderní farmakologie vyrábí léčivo v aerosolových plechovkách.Před použitím přípravku si musíte prostudovat informace na obalu.
Dávkování, pravidla aplikace
Pro léčebné účely se používá vodný roztok v poměru 1:50, stříkají se plásty nebo se kompozice přidává do krmítka, ze kterého včely žerou.
Pro preventivní účely se vodný roztok zředí v poměru 1:100, plást se postříká kompozicí nebo se přidá do krmítka pro včely.
Nežádoucí účinky, kontraindikace, omezení použití
Pro dosažení maximálního terapeutického účinku doporučují výrobci používat Izatizon pouze v teplé sezóně. Úly by neměly stát na silně větraném místě, doporučuje se je uzavřít.
Nástroj nemá žádné kontraindikace a lze jej použít k léčbě jakýchkoli hospodářských zvířat. Proto si droga získala oblibu mezi chovateli hospodářských zvířat a těší se jejich důvěře. Aby nedošlo k předávkování, je nutné dodržovat požadavky pokynů a zředit kompozici ve správném poměru.
Skladovatelnost a podmínky skladování
Lék je nutné uchovávat na tmavém místě. Doba použitelnosti 5 let.
Závěr
Isatizon je širokospektrální lék. Pomáhá při prevenci a léčbě nemocí včel, je účinný při dodržení dávkování a pravidel užívání.
Recenze
Včelín chováme dlouhodobě, jednou za dva roky tímto prostředkem pro prevenci postříkáme včelstva. U včel nebyly žádné zdravotní problémy ani propuknutí nemocí. Se sousedy je společný zarybněný rybník, preventivně tam používáme Izatizon, aby ryby neonemocněly. Dobrý produkt, levný a veselý.
Můj otec používal lék Izatison k léčbě včel, když se v úlu objevila plíseň. Kapky jsem nemusel ředit, našli jsme v prodeji hotový aerosol pro včely, což je velmi výhodné. Sprej odvedl skvělou práci, proto doporučuji ke koupi. Cena je dobrá a výsledek je znát.
